常规兔源多克隆抗体定制服务常规小鼠源多克隆抗体定制服务常规大鼠源多克隆抗体定制服务常规鸡源多克隆抗体制备服务快速抗体制备服务多克隆抗体制备服务小鼠源单克隆抗体定制服务大鼠源单克隆抗体定制服务仓鼠源单克隆抗体定制服务兔子单克隆抗体制备鸡单克隆抗体制备猴子单克隆抗体制备犬单克隆抗体制备单克隆抗体/杂交瘤细胞定制服务免疫组化保证性抗体制备转录后特殊修饰结构识别抗体制备抗专一亚型抗体制备配体模拟激活性抗体制备捕获\报告配对抗体制备功能阻遏\专一型抗抗体制备特殊功能抗体制备服务膜蛋白抗体制备服务半抗原抗体制备服务脂质体免疫抗体制备服务自体抗原抗体制备服务特殊性质抗原抗体制备服务基于全细胞抗原呈递的抗体制备方案基于传统单克隆抗体制备方案G蛋白偶联受体抗体制备服务抗离子通道蛋白抗体制备服务抗膜蛋白抗体制备专题噬菌体展示文库构建工程化骨架蛋白文库构建限制性多肽文库构建噬菌体展示文库筛选内化抗体筛选热稳定性scFv/Fab筛选蛋白酶底物筛选单域抗体库构建全人源单抗制备噬菌体展示和抗体文库服务双特异性纳米抗体制备单域(纳米)抗体库构建纳米抗体亲和力成熟服务人源/人源化纳米抗体制备DNA免疫技术制备膜蛋白纳米抗体抗血脑屏障纳米抗体制备纳米抗体服务细菌展示服务核糖体展示服务酵母展示服务体外展示&其他服务酵母双杂交筛选服务哺乳动物细胞双杂交服务胞内抗体制备服务双杂交服务原位杂交ISH荧光原位杂交FISH原位杂交服务X-射线晶体学通过肽库方法通过LC-MS法通过三维电镜方法基于生物信息学预测单克隆抗体表位作图抗体测序服务表面等离子共振服务(SPR)等温滴定量热法服务(ITC)双偏振极化干涉测量服务(DPI)差示扫描量热法服务(DSC)免疫原性评价抗体亲和力检测抗体鉴定抗体分析服务二价和双特异性scFv/Fab服务嵌合抗原受体(CAR)构建服务嵌合IgG构建scFV/Fab构建双可变区免疫球蛋白制备服务定制半胱氨酸改型抗体超长CDR3s牛抗体制备非猴抗体的硅烷化抗体稳定性改进抗体亲和力成熟抗体人源化服务抗体经典化服务人源抗体骆驼化服务人源抗体初始化服务抗体工程服务双特异性T细胞衔接器(BiTE)Fab-scFv融合蛋白KNODBS-INTO-HOLE技术杂交瘤细胞系双特异性抗体抗体和蛋白标记抗体生物素化Fab PEG化抗体偶联药物纳米金标记抗体糖纳米粒标记抗体标记服务酶和蛋白定向进化突变库构建服务蛋白工程服务抗体人源化亲和力成熟人源化牛超长CDR3抗体服务人源化纳米抗体制备人源化猴单抗制备人源/人源化抗体服务蛋白/抗体偶联服务生物素化服务寡聚糖生物偶联寡核苷酸生物偶联表面锚定服务脂质体偶联服务PEG修饰服务合成聚合物修饰生物偶联服务重组IgG制备scFv/Fab制备双特异性抗体制备抗体和蛋白纯化服务重组抗体制备服务稳定细胞系构建定制细胞裂解液稳定细胞系开发cGMP生产治疗性抗体和蛋白生产大规模发酵服务cGMP生产大肠杆菌蛋白表达系统枯草芽孢杆菌表达系统酵母蛋白表达系统昆虫杆状病毒表达系统哺乳动物细胞蛋白表达系统富含二硫键蛋白的原核表达服务无细胞系统蛋白表达服务Marzf单一蛋白制备服务蛋白表达与纯化服务抗体&多肽文库重组蛋白产品杂交瘤细胞系稳定细胞系CAR-T载体抗体定制服务平台噬菌体展示平台抗体药物开发平台CAR-T平台蛋白表达与纯化平台大规模发酵服务平台基因测序平台
兔子单克隆抗体制备(Monoclonal Rabbit Antibody Production)

兔子单克隆抗体制备(Monoclonal Rabbit Antibody Production)

副标题

限于专利技术保护的原因,目前,全球兔单克隆杂交瘤细胞制备技术被一家公司垄断,所以我们无法通过像类似制备小鼠单克隆抗体那样,制备兔源杂交瘤细胞获得兔源单克隆抗体。为此,公司在一大批免疫学与基因工程学专家的帮助下,先后建立了两套兔源单克隆抗体制备方案。这两种方案均不依赖于兔源骨髓瘤细胞,但是其抗体的种源特性毫无疑问是兔源,在保留兔源单克隆抗体优势的同时,大大压缩试验周期,提高试验成功率。

方案一噬菌体展示技术

M13单链丝状噬菌体展示系统是目前应用最广泛的文库展示系统,通过将蛋白、抗体或多肽与噬菌体pIII蛋白融合表达,使之参与噬菌体组装,并展示在噬菌体表面,形成噬菌体展示文库。使用噬菌体展示文库,针对特定靶分子进行3-5 轮亲和筛选,可以富集能特异性结合靶分子的噬菌体,得到相应的DNA序列信息。

艾柏森(北京)生物科技有限公司目前开发的噬菌体展示技术服务平台涵盖了免疫抗体库、天然抗体库等常用的文库类型,可根据客户的特殊需求定制个性化文库,并提供灵活高效的筛选服务。在此技术储备的基础上,我们提供的兔源单克隆抗体噬菌体展示方案,可高效灵活的根据客户需要大规模探测高亲和力抗体,同时结合公司专利的兔源Fc表达质粒,与高效真核表达系统,使得我们的抗体拥有极高的表达效率。

方案二重组抗体制备技术

艾柏森(北京)生物科技开发出一种革命性的单克隆抗体生产技术,使单克隆抗体的生产不杀害动物,不依赖杂交瘤。该技术通过分离培养B细胞,并利用ELISA、Western Blot、IHC(Immunohistochemistry)等方法筛选出抗原特异性B细胞。再通过分子克隆的手段重组表达完整的抗体分子。该技术可用于开发高品质的兔子和小鼠等不同物种的单克隆抗体。

其主要依托技术有:

高效的B细胞体外培养体系

高通量B细胞筛选技术

稳定的VH和VL抗体分子表达体系

高通量的抗体分子测序平台

服务项目

服务项目

(Service Items)

周期(周)

Time(weeks)

方案一:

噬菌体展示技术

(Phage Display)

方案二:

异源表达重组技术

(Heterogeneous Recombination)

多肽

Peptide

小分子

Molecular

磷酸基/甲基/乙基化多肽

Phosphate/Methyl/

acetyl-specific

目前只有针对部分肿瘤相关通路热点分子的抗原,详情请与公司技术人员沟通

多肽设计与合成

Peptide design & synthesis

多肽设计

Peptide design

~2

可选,免费

多肽合成

Peptide synthesis





小分子或多肽偶联

conjugation




免疫阶段

Immunization

免疫2只兔子

Immunized 2 rabbits

~8

ELISA检测

Elisa detection

cDNA制备

cDNA preparation

逆转录制备cDNA文库

prepare cDNA library by RT-PCR

~1

cDNA 文库质检

cDNA library QC check

构建Fab抗体库

Fab library   construction

VH与VL基因获得

obtained VH and VL   genes

10~15

构建初级抗体库

primary antibody   library construction

构建Fab抗体库

Fab library   construction

噬菌体筛选

phage screening

噬菌体颗粒包装

phage particles package

10~15


磁珠亲和筛选

magnetic beads affinity screening


阳性克隆回收基因测序

Recover positive clones and DNA sequencing


抗体表达

Antibody expression

特异性双链基因合成与Fc基因桥接

synthetic of target   phage gene and Fc gene

~5

构建真核表达载体

Eukaryotic system   expression plasmids construction

真核表达

Eukaryotic system   expression


稳转细胞系构建

Stably transfected   cell line construction




纯化与检测

Purification and detection

标签纯化

Tag affinity purification

~1

特异性亲和纯化

Antigen specific affinity purification

总周期(月)

Total lead   time(months)

7~9

3~5













注:

价格面议;

请慎重考虑周期事宜,以上时间仅为理想条件下最短周期;

为了缩短试验周期建议考虑自行提供抗原直接免疫做起;

免疫环节设立第一个验收节点,效价合格,取脾脏,效价不合格,终止实验;

抗体库构建步骤启动之前,至少支付此步骤的50%全款;完成项目,支付尾款。

服务组合:

客户:提供抗原蛋白信息

制备流程:

1)抗原制备\质粒表达蛋白纯化\多肽设计合成及交联;

2)免疫:首次免疫兔子2只,失败后又加免3只;

3)ELISA/Western-blot试验监控兔子血清中的抗体效价和特异性,根据ELISA和WB检测,筛选兔子;

4)cDNA文库制备与噬菌体载体构建;

5)磁珠链霉素亲和筛选;

6)阳性克隆测序与基因合成桥接;

7)真核表达质粒构建;

8)稳转细胞构建;

9)试表达鉴定与结果交付;

交付产品(每种抗原,所有兔子总共的)

1)1株针对免疫原特异性的单克隆杂交瘤细胞株

2)1ml(浓度约0.1~1mg/ml)纯化的抗体,Elisa效价应至少1:200以上;

制备时间:3~6个月

成功案例:

Publication: Plos One

IF:3.05

Title:TSC1/2 signaling complex is essential for peripheral naïve CD8+ T   cell survival and homeostasis in mice.

Name:anti- Tuberin antibody

Species: Mouse

Type:Rabbit Recombination Monoclonal antibody

兔子单克隆抗体制备.1.jpg

兔子单克隆抗体制备.2.png

Immunohistochemical analysis ofparaffin-embedded mouse placenta tissue using anti-Tuberin antibody. Counterstained with hematoxylin.

Recommended constration: 1:200

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