常规兔源多克隆抗体定制服务常规小鼠源多克隆抗体定制服务常规大鼠源多克隆抗体定制服务常规鸡源多克隆抗体制备服务快速抗体制备服务多克隆抗体制备服务小鼠源单克隆抗体定制服务大鼠源单克隆抗体定制服务仓鼠源单克隆抗体定制服务兔子单克隆抗体制备鸡单克隆抗体制备猴子单克隆抗体制备犬单克隆抗体制备单克隆抗体/杂交瘤细胞定制服务免疫组化保证性抗体制备转录后特殊修饰结构识别抗体制备抗专一亚型抗体制备配体模拟激活性抗体制备捕获\报告配对抗体制备功能阻遏\专一型抗抗体制备特殊功能抗体制备服务膜蛋白抗体制备服务半抗原抗体制备服务脂质体免疫抗体制备服务自体抗原抗体制备服务特殊性质抗原抗体制备服务基于全细胞抗原呈递的抗体制备方案基于传统单克隆抗体制备方案G蛋白偶联受体抗体制备服务抗离子通道蛋白抗体制备服务抗膜蛋白抗体制备专题噬菌体展示文库构建工程化骨架蛋白文库构建限制性多肽文库构建噬菌体展示文库筛选内化抗体筛选热稳定性scFv/Fab筛选蛋白酶底物筛选单域抗体库构建全人源单抗制备噬菌体展示和抗体文库服务双特异性纳米抗体制备单域(纳米)抗体库构建纳米抗体亲和力成熟服务人源/人源化纳米抗体制备DNA免疫技术制备膜蛋白纳米抗体抗血脑屏障纳米抗体制备纳米抗体服务细菌展示服务核糖体展示服务酵母展示服务体外展示&其他服务酵母双杂交筛选服务哺乳动物细胞双杂交服务胞内抗体制备服务双杂交服务原位杂交ISH荧光原位杂交FISH原位杂交服务X-射线晶体学通过肽库方法通过LC-MS法通过三维电镜方法基于生物信息学预测单克隆抗体表位作图抗体测序服务表面等离子共振服务(SPR)等温滴定量热法服务(ITC)双偏振极化干涉测量服务(DPI)差示扫描量热法服务(DSC)免疫原性评价抗体亲和力检测抗体鉴定抗体分析服务二价和双特异性scFv/Fab服务嵌合抗原受体(CAR)构建服务嵌合IgG构建scFV/Fab构建双可变区免疫球蛋白制备服务定制半胱氨酸改型抗体超长CDR3s牛抗体制备非猴抗体的硅烷化抗体稳定性改进抗体亲和力成熟抗体人源化服务抗体经典化服务人源抗体骆驼化服务人源抗体初始化服务抗体工程服务双特异性T细胞衔接器(BiTE)Fab-scFv融合蛋白KNODBS-INTO-HOLE技术杂交瘤细胞系双特异性抗体抗体和蛋白标记抗体生物素化Fab PEG化抗体偶联药物纳米金标记抗体糖纳米粒标记抗体标记服务酶和蛋白定向进化突变库构建服务蛋白工程服务抗体人源化亲和力成熟人源化牛超长CDR3抗体服务人源化纳米抗体制备人源化猴单抗制备人源/人源化抗体服务蛋白/抗体偶联服务生物素化服务寡聚糖生物偶联寡核苷酸生物偶联表面锚定服务脂质体偶联服务PEG修饰服务合成聚合物修饰生物偶联服务重组IgG制备scFv/Fab制备双特异性抗体制备抗体和蛋白纯化服务重组抗体制备服务稳定细胞系构建定制细胞裂解液稳定细胞系开发cGMP生产治疗性抗体和蛋白生产大规模发酵服务cGMP生产大肠杆菌蛋白表达系统枯草芽孢杆菌表达系统酵母蛋白表达系统昆虫杆状病毒表达系统哺乳动物细胞蛋白表达系统富含二硫键蛋白的原核表达服务无细胞系统蛋白表达服务Marzf单一蛋白制备服务蛋白表达与纯化服务抗体&多肽文库重组蛋白产品杂交瘤细胞系稳定细胞系CAR-T载体抗体定制服务平台噬菌体展示平台抗体药物开发平台CAR-T平台蛋白表达与纯化平台大规模发酵服务平台基因测序平台
噬菌体展示&抗体文库服务

噬菌体展示&抗体文库服务

Phage Display & Antibody Library Services

噬菌体展示技术服务平台

   M13单链丝状噬菌体展示系统是目前应用最广泛的文库展示系统,通过将蛋白、抗体或多肽与噬菌体pIII蛋白融合表达,使之参与噬菌体组装,并展示在噬菌体表面,形成噬菌体展示文库。使用噬菌体展示文库,针对特定靶分子进行3-5轮亲和筛选,可以富集能特异性结合靶分子的噬菌体,得到相应的 DNA序列信息。

  艾柏森生物目前开发的噬菌体展示技术服务平台涵盖了免疫抗体库、天然抗体库等常用的文库类型,可根据客户的特殊需求定制个性化文库,并提供灵活高效的筛选服务。

噬菌体展示服务简介

   M13单链丝状噬菌体展示系统是目前应用最广泛的文库展示系统,通过将蛋白、抗体或多肽与噬菌体pIII蛋白融合表达,使之参与噬菌体组装,并展示在噬菌体表面,形成噬菌体展示文库。使用噬菌体展示文库,针对特定靶分子进行3-5轮亲和筛选,可以富集能特异性结合靶分子的噬菌体,得到相应的 DNA序列信息。

  艾柏森生物目前开发的噬菌体展示技术服务平台涵盖了免疫抗体库、天然抗体库等常用的文库类型,可根据客户的特殊需求定制个性化文库,并提供灵活高效的筛选服务。

Phage Display & Antibody Library Services; 噬菌体展示&抗体文库服务


艾柏森生物平台系统主要包括pComb3噬菌体展示系统和pCANTAB5e噬菌体展示系统:

★  pComb3噬菌体展示技术流程

1>  抗体基因库的获得:收集目标抗体宿主的免疫细胞,提取细胞总RNA;反转录后,使用多对引物分别扩增VH-CH1抗体基因片段和VL-CL1抗体基因片段;

2>  抗体基因库转化大肠杆菌:将以上扩增的抗体基因库连接至pComb3质粒,随后电转化大肠杆菌XL12 Blue;同时鉴定基因库库容(及抗体基因的插入率);

3>  噬菌体Fab抗体库的构建:将辅助噬菌体VCSM13加入到转入了抗体基因的,生长至对数生长期的大肠杆菌中进行噬菌粒拯救;培养过夜后,离心收集上清即获得噬菌体Fab抗体库;

4>  抗体库的滴度测定:取少量上述获得的噬菌体Fab抗体库,梯度稀释后进行噬斑培养实验,观察噬斑生长情况以判断噬菌体Fab抗体库的滴度;

5>  噬菌体抗体库的富集筛选:使用靶标抗原包被酶联板,加入噬菌体抗体进行孵育,随后进行洗板、洗脱;将洗脱下来的噬菌体抗体进行中和后,再次感染细菌,并进行第二轮的淘洗;共进行3轮淘洗,每一轮洗脱后都进行滴度测定;最后一轮筛选时,设BSA包被的对照组以确定是否富集了大量抗BSA的噬菌体抗体。


Phage Display & Antibody Library Services; 噬菌体展示&抗体文库服务

图1 pComb3噬菌体展示技术流程


Phage Display & Antibody Library Services; 噬菌体展示&抗体文库服务


图2 噬菌粒载体pComb3遗传图谱


Phage Display & Antibody Library Services; 噬菌体展示&抗体文库服务


图3 辅助噬菌体VCSM13遗传图谱

★  pCANTAB5e噬菌体展示技术流程

1>  ScFv基因库的获得:收集目标抗体宿主的免疫细胞,提取细胞总RNA;反转录后,使用多对引物分别扩增抗体基因VH和VL,纯化回收VH和VL片段后,使用Linker引物将全套VH和VL基因随机拼接成ScFv基因库;

2>  ScFv基因库转化大肠杆菌:将全套 ScFv 基因片段连接至pCANTAB5e载体,随后电转化大肠杆菌TG1;同时鉴定ScFv基因库库容(及基因的插入率);

3>  噬菌体ScFv抗体库的构建:将辅助噬菌体M13K07加入到转入了ScFv抗体基因的,生长至对数生长期的大肠杆菌中进行噬菌粒拯救;培养过夜后,离心收集上清即获得噬菌体ScFv抗体库;

4>  抗体库的滴度测定:取少量上述获得的噬菌体ScFv抗体库,梯度稀释后进行噬斑培养实验,观察噬斑生长情况以判断噬菌体ScFv抗体库的滴度;

5>  噬菌体抗体库的富集筛选:使用靶标抗原包被酶联板,加入噬菌体抗体进行孵育,随后进行洗板、洗脱;将洗脱下来的噬菌体抗体进行中和后,再次感染细菌,并进行第二轮的淘洗;共进行3轮淘洗,每一轮洗脱后都进行滴度测定;最后一轮筛选时,设BSA包被的对照组以确定是否富集了大量抗BSA的噬菌体抗体。


Phage Display & Antibody Library Services; 噬菌体展示&抗体文库服务


图1 pCANTAB5e噬菌体展示技术流程


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图2 噬菌粒载体pCANTAB5e遗传图谱


Phage Display & Antibody Library Services; 噬菌体展示&抗体文库服务


图3 辅助噬菌体M13K07遗传图谱

噬菌体展示技术服务项目

表1 噬菌体展示技术服务项目:噬菌体展示抗体库构建


服务描述

服务周期

价格

cDNA 合成

免疫细胞收集,总RNA提取,反转录合成cDNA。

1周

¥98000

质粒构建

以以上cDNA为模板,  PCR扩增抗体基因片段,并连接至载体 (例如:pComb3或pCANTAB5e载体) 。

4周

转化

将已构建好的载体电转化至大肠杆菌菌株。

1周

库容鉴定

(1)以上转化菌株复苏后,梯度稀释,并涂布平板,计算阳性克隆数; (2)挑选10个阳性单克隆,提取质粒后,进行酶切验证; (3)通过阳性克隆数和酶切验证的结果,计算抗体库库容。

抗体库生产

通过辅助噬菌粒拯救获得噬菌体展示抗体库。

1周

运输

低温(干冰)运输。

N/A

免费

总计:

2-3月

¥98000

注:项目启动后,客户需支付80%的预付款。


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