常规兔源多克隆抗体定制服务常规小鼠源多克隆抗体定制服务常规大鼠源多克隆抗体定制服务常规鸡源多克隆抗体制备服务快速抗体制备服务多克隆抗体制备服务小鼠源单克隆抗体定制服务大鼠源单克隆抗体定制服务仓鼠源单克隆抗体定制服务兔子单克隆抗体制备鸡单克隆抗体制备猴子单克隆抗体制备犬单克隆抗体制备单克隆抗体/杂交瘤细胞定制服务免疫组化保证性抗体制备转录后特殊修饰结构识别抗体制备抗专一亚型抗体制备配体模拟激活性抗体制备捕获\报告配对抗体制备功能阻遏\专一型抗抗体制备特殊功能抗体制备服务膜蛋白抗体制备服务半抗原抗体制备服务脂质体免疫抗体制备服务自体抗原抗体制备服务特殊性质抗原抗体制备服务基于全细胞抗原呈递的抗体制备方案基于传统单克隆抗体制备方案G蛋白偶联受体抗体制备服务抗离子通道蛋白抗体制备服务抗膜蛋白抗体制备专题噬菌体展示文库构建工程化骨架蛋白文库构建限制性多肽文库构建噬菌体展示文库筛选内化抗体筛选热稳定性scFv/Fab筛选蛋白酶底物筛选单域抗体库构建全人源单抗制备噬菌体展示和抗体文库服务双特异性纳米抗体制备单域(纳米)抗体库构建纳米抗体亲和力成熟服务人源/人源化纳米抗体制备DNA免疫技术制备膜蛋白纳米抗体抗血脑屏障纳米抗体制备纳米抗体服务细菌展示服务核糖体展示服务酵母展示服务体外展示&其他服务酵母双杂交筛选服务哺乳动物细胞双杂交服务胞内抗体制备服务双杂交服务原位杂交ISH荧光原位杂交FISH原位杂交服务X-射线晶体学通过肽库方法通过LC-MS法通过三维电镜方法基于生物信息学预测单克隆抗体表位作图抗体测序服务表面等离子共振服务(SPR)等温滴定量热法服务(ITC)双偏振极化干涉测量服务(DPI)差示扫描量热法服务(DSC)免疫原性评价抗体亲和力检测抗体鉴定抗体分析服务二价和双特异性scFv/Fab服务嵌合抗原受体(CAR)构建服务嵌合IgG构建scFV/Fab构建双可变区免疫球蛋白制备服务定制半胱氨酸改型抗体超长CDR3s牛抗体制备非猴抗体的硅烷化抗体稳定性改进抗体亲和力成熟抗体人源化服务抗体经典化服务人源抗体骆驼化服务人源抗体初始化服务抗体工程服务双特异性T细胞衔接器(BiTE)Fab-scFv融合蛋白KNODBS-INTO-HOLE技术杂交瘤细胞系双特异性抗体抗体和蛋白标记抗体生物素化Fab PEG化抗体偶联药物纳米金标记抗体糖纳米粒标记抗体标记服务酶和蛋白定向进化突变库构建服务蛋白工程服务抗体人源化亲和力成熟人源化牛超长CDR3抗体服务人源化纳米抗体制备人源化猴单抗制备人源/人源化抗体服务蛋白/抗体偶联服务生物素化服务寡聚糖生物偶联寡核苷酸生物偶联表面锚定服务脂质体偶联服务PEG修饰服务合成聚合物修饰生物偶联服务重组IgG制备scFv/Fab制备双特异性抗体制备抗体和蛋白纯化服务重组抗体制备服务稳定细胞系构建定制细胞裂解液稳定细胞系开发cGMP生产治疗性抗体和蛋白生产大规模发酵服务cGMP生产大肠杆菌蛋白表达系统枯草芽孢杆菌表达系统酵母蛋白表达系统昆虫杆状病毒表达系统哺乳动物细胞蛋白表达系统富含二硫键蛋白的原核表达服务无细胞系统蛋白表达服务Marzf单一蛋白制备服务蛋白表达与纯化服务抗体&多肽文库重组蛋白产品杂交瘤细胞系稳定细胞系CAR-T载体抗体定制服务平台噬菌体展示平台抗体药物开发平台CAR-T平台蛋白表达与纯化平台大规模发酵服务平台基因测序平台
抗体测序服务

抗体测序服务

副标题

  艾柏森生物科技有限公司作为值得信赖的抗体研发服务供应商,拥有专业的技术团队,可为客户提供卓越的抗体测序服务。艾柏森生物打造的全新一代抗体测序平台,基于世界领先的PEAKS AB术,这项技术还适用于其他亚型和不同形式的抗体,如:IGM,荧光偶联抗体,固定化抗体,不同物种的抗体等。

技术平台

基于质谱的抗体药物一站式平台

样品无需出国序列全覆盖测序保准确

技术优势

BSI 独家授权的质谱抗体测序技术
全球排名前五十大制药公司使用
二十年的专业技术服务团队

技术流程

抗体测序是直接针对抗体蛋白进行从头测序,无需细胞株。BSI授权的质谱抗体测序技术应用多酶解技术,高分辨率质谱和独特数据分析的抗体测序技术。目前,我们的标准程序结合了自上而下和自下而上的质谱技术,确保了每一个氨基酸的正确性和全抗体的序列精度,包括N末端及C末端的修饰和N-连接的聚糖。

服务介绍

服务项目

(Service items)

周期(工作日/个)

Time(day)

服务要求

Service requirements

价格

(RMB)

抗体蛋白全测序服务

(Antibody   protein complete sequencing services)

5个工作日/单个样品

提供:单克隆抗体样品(理想状态:≥0.1 mg,≥95%纯度)。

获得:全蛋白质序列Ile/Leu区分;全面的PEAKS   AB报告;原始的LC-MS / MS数据

询价

亮氨酸/异亮氨酸甄别(Leucine/isoleucine screening)

提供:纯化蛋白样品(理想状态:≥20 µg,≥95%纯度)&蛋白质序列

获得:通过EThcD质谱进行Ile / Leu区分;PEAKS AB分析报告

询价


注:如果您的样品不满足上面列出的所有标准(数量有限,纯度较低或样品混合,稀有物种或工程样品)

或者有任何特殊需求,请与我们联系。我们仍然会根据您提供的样品和提出的需求尽量提供定制化服务。


核心优势

1. 全序列覆盖和保测序准确

我们的抗体测序技术可确保序列的每个位点的氨基酸有超过十种不同的肽段支持,并在氨基酸水平上进行质量控制,确保每个氨基酸在质谱里有强的离子片段峰证据。

核心优势.png


2. 完整抗体质量核对

进行重链和轻链的完整质量测定,以确认组装的抗体序列,包括N末端焦谷氨酸修饰,重链C末端赖氨酸离去和N-连接的聚糖。

完整抗体质量核对.png


3. 亮氨酸(L)和异亮氨酸(I)的确定

亮氨酸(Leu)和异亮氨酸(Ile)残基通常被MS认为是无法区分的。由于这种歧义性,很难在两个残基之间进行区分,并且这可能会对抗体的特异性和亲和力的整体表现产生严重影响。在我们的抗体测序服务中,我们使用一种集成策略,该策略结合了:1)EThcD中的w-ion检测、2)酶裂解选择性、3)同源性统计数据,以明确区分Leu / Ile残基。

亮氨酸(L)和异亮氨酸(I)的确定.png


等重氨基酸测序

与其它基于MS测序方法不同的是,我们可以分辨大多数等重氨基酸复合物

★ W可与GE、AD、SV区分

★ R可从GV中区别出来

★ Q可从GA、K中区别出来

★ N可从GG中区别出来

Database Assisted Shotgun Sequencing, DASS

Figure 1.Workflow of Service


运用DASS技术对V、J、C片段测序

  目前已有的一些数据库(如NCBI)虽包含抗体V、J、C片段序列,但是在抗体成熟的过程中,一个B细胞中的抗体基因要经过体细胞突变的过程才会产生高亲和力的成熟抗体。

  我们采用独特的计算方法,并能匹配相应物种的突变肽段,保证每条肽段都会被检测到,且每一个氨基酸位点都会生成20-7-条MS/MS光谱,对最难测序的proline和arginine的肽段也可实现测序。


Database Assisted Shotgun Sequencing, DASS

Figure 2.Sequence coverage is verified with the integrity of the combination of multipleLC-MS/MS datasets


CDR3区测序

  抗体轻链的CDR3去多由胚系基因编码,而重链的CDR3区则由D基因编码,D基因大部分区域由于受到核酸酶及末端转移酶等重组酶的作用而发生基因重排,导致抗体重链CDR区在数据库中无法进行同源对比,而只能对其进行de novo测序。高质量的质谱数据与高效率的数据挖掘算法的结合,使我们对抗体CDR3区域的解读更为有力,我们可以测得数据库中无同源序列的20kDa的蛋白质。


服务优势


保证100%测序准确度

对轻链的测序误差范围在+/-1.2Da,对重链的误差范围在+/-1.8Da

保证VJC、DVJC区域100%覆盖

可对荧光标记单抗、IgMs及其他非传统抗体进行测序

无需杂交瘤,仅需50-100ug纯化的抗体


结果交付

MS测定抗体氨基酸序列

超变区分析

数据库辅助序列拼接

精确抗体序列生成

Intact Mass序列再确认

MS/MS再验证高变位点和CDR3


案例:

Antibody Light Chain

1. Amino Acid Sequence

001

DVIMTQTPLS LPVSLGDQAS LSCRSSQYIV HSNGNTYLEWYLQKPGQSPK

050

051

LLIYKVSNRF SGVPDRFSGS GSGTDFTLKI SRVEAEDLGVYYCFQGSHVP

100

101

LTFGAGTKLE LKRADAAPTV SIFPPSSEQL TSGGASVVCFLNNFYPKDIN

150

151

VKWKIDGSER QNGVLNSWTD QDSKDSTYSM SSTLTLTKDEYERHNSYTCE

200

201

ATHKTSTSPIVKSFNRNEC

219

2. Intact Mass

Calculated Average Mass (Mc): 24,197.9Da

Measured Average Mass (Mm): 24,197.4Da

Average Mass Difference: Mm Mc = 24197.4 – 24,197.9 = - 0.5 Da

If the absolute massdifference is smaller than 1.2 Da for light chains, we regard it is a match betweenthe calculated and measured averagemasses.

Intact Mass.png

* This figureof the light chain intact mass measurement result is only used forillustration. Some data information is removed.

3. Eptide Mapping at 0.1% of FDR at Peptide-SpectrumLevel

Fragment Ion Confidence:   RED>95%    BLUE>85% BLACK<85%

Intact Mass2.png


Intact Mass3.png

4. Typical Peptides Selected for VariableRegion

Intact Mass4.png

5. Ile/Leu Differentiation

Intact Mass5.png

Note: Themention of Antibody Light Chain as above.



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