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GPI锚定服务

GPI锚定服务

副标题

技术介绍:

在真核生物中的GPI锚有一个共同的核心结构,该核心结构主要由以下几部分组成:磷脂酰肌醇、葡糖胺、三个甘露糖(在酿酒酵母中是4个)和磷脂酰乙醇胺。其结构为(磷脂酰乙醇胺-6-甘露糖-α1-2-甘露糖-α1-6-甘露糖-1-4-氨基葡萄糖-α1-6-磷脂酰肌醇),这一结构在所有物种中都是保守的。其中,磷脂酰肌醇是合成GPI锚的起始分子,磷脂酰肌醇的sn-2位含有一个多不饱和脂肪酸,多不饱和脂肪酸取代羧基端的跨膜区而固定于质膜上。合成GPI锚前体后,通过磷脂酰乙醇胺连接位于细胞表面的蛋白质而形成GPI锚定蛋白。这里需要注意,GPI锚的结构在与蛋白质结合后及参与生物合成过程中会发生重构。GPI锚中侧链及脂质基团因其结合的蛋白质随着物种的不同而呈现多样性。(GPI结构如上图)

GPI锚定服务.1.png

GPI锚组装在内质网的膜小叶上。完成后,其被转移至内腔,并将蛋白质的羧基末端连接至GPI锚。在跨膜转运后,通过将磷脂酰肌醇脂质基团插入疏水脂质双层中,GPI 锚定蛋白与细胞膜结合。一旦产生GPI 锚定蛋白,Man3-GlcN寡糖核心在从细胞分泌期间可经历额外的糖基化修饰。

GPI 锚定蛋白的释放可以通过用磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PLC-PI)(本公司可以订购)处理来完成。该酶特异性地水解磷脂酰肌醇的磷酸二酯键,形成游离的1,2-二酰基甘油和糖肽结合的肌醇环-1,2磷酸盐。如果肌醇被酰化,则不会发生酶促切割;需要用温和的碱性条件进行预处理以除去脂肪酸基团。在酶促切割后,可以在用Triton® X-114(本公司可以订购)处理膜之后,从不溶性沉淀/级分中回收GPI锚。从细胞膜中酶促释放GPI锚可以触发信号转导的第二信使。

本司服务:

基于本公司较为成熟且很有优势的蛋白质表达平台,抗体制备平台,噬菌体展示系统等科研平台,以优秀的科研技术,根据您的需求,定制实验计划,包含各物种不同来源蛋白质与GPI的锚定服务,为您的研究提供便捷。

(下图:GPI锚定详细示意图)

GPI锚定服务.2.jpg

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