服务简介: 与瞬时转染不同,稳定细胞系是指外源基因进入受体细胞,并整合到细胞的染色体上,使得宿主可以长期表达目的基因。稳定细胞系表达蛋白(抗体)的稳定性更好,批次间差异也更小,然而构建一个有效的细胞系是一件复杂而费时的工作——艾柏森专业的生物医药研发服务机构,拥有丰富的哺乳动物细胞培养经验,基于公司多样的成熟平台,为您提供优质的稳定细胞系构建服务。 本公司服务包括但不限于下列服务项目: 因过表达细胞株构建服务包括目的基因过表达慢病毒载体构建、病毒包装、细胞转染和筛选。您只需提供目的基因的cDNA质粒和需要构建的细胞系,我们将按照您的要求完成目的基因过表达细胞株的构建和检测,提供给您高质量的基因过表达稳定细胞株。 艾柏森的RNA干扰基因敲减细胞系构建基于慢病毒表达系统,一般采用U6启动子驱动的pLVshRNA-puro或pLVshRNA-EGFP(2A)puro载体构建RNA干扰稳定细胞株,服务内容包括干扰载体构建、靶点筛选、干扰效率验证及稳定细胞筛选和克隆。 3、CRISPR基因敲除稳定细胞株构建服务: 随着talen和Cas9/gRNA基因敲除系统的出现,基因定点敲除的难度大幅下降。全新的技术将基因敲除从价格高昂,耗时漫长的ZNF系统,逐渐变成简便的研究工具。现在我们可提供Talen和Cas9/gRNA两个系统的基因敲除服务。包括基因敲除靶点设计,talen质粒组装,Cas9/gRNA质粒构建及基因敲除效率验证。 稳定转染细胞株服务流程: 稳定细胞株筛选方法: 1、转染质粒后,单克隆方法筛选稳定细胞系:对大多数细胞转染效率较低。对于基因过表达,如果转染效率达到40%,基因过表达尚可。但是对于基因干扰实验,对转染效率要求远远高于基因过表达,通常质粒转染无法满足。 另外,质粒游离于细胞质中,很快降解,无法满足较长时间的检测项目;质粒转染整合几率极低,稳定细胞株构建耗时耗力,且得率很低,往往需要挑取单克隆株。 |
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