对于绝大多数的可溶性蛋白抗原,我们可以制备全长的蛋白抗原以免疫动物制备抗体,但是对于那些依托双脂层膜结构建立起来的多次跨膜蛋白,抗体的制备就没那么简单了。比如G蛋白偶联受体(GPCR)蛋白就是一个典型的大型、多次跨膜的重要蛋白家族,它是许多疾病的病理信号参与者,同时也是近一半现代药物的作用靶点。然而要想制备GPCR的抗体确实非常困难,这主要有两方面因素造成,一是众多的跨膜区间造成蛋白的一级结构被分割成彼此间隔在细胞膜内外两侧的多个区域,而人为去掉这些结构则会造成蛋白构象丧失原有形态;二是表达量极低,由于作为膜通道,在细胞信号转导中发挥关键作用,人为过表达外源的GPCR,会导致细胞信号紊乱,极易造成细胞死亡,所以我们很难制备得到采用全蛋白所需的最少蛋白计量。 艾柏森生物通过多年的项目实践经验,积累了数种多次跨膜蛋白抗体制备方法,包括经典的可溶区蛋白设计方案,重组蛋白免疫方案,以及公司技术人员开发的基于全细胞免疫的抗体制备方案,以最小的试验风险,获得最优品质的抗体,为客户量身打造最佳的抗体制备思路。 ★ 服务组合★ 经典案例(两次跨膜蛋白抗体制备 Twice Transmembrane antibody service)HeLa cells weretransfected with plasmids encoding FUNDC1–Myc for the indicated times and themitochondrial (TIM23, TOM20, VDAC1), endoplasmic reticulum (calnexin) and Golgimarker (GM130) proteins were detected by western blotting. |
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