技术简介
G蛋白关联受体(GPCR)家族是一类7次跨膜蛋白,也是许多疾病治疗药物的靶点,一些自身无法靶向GPCR的药物,在一些靶向GPCR分子的带领下,作用于GPCR同样被证实具有药理活性。随着免疫技术的发展,尤其是GPCR蛋白制备与纯化工艺的改进,目前有越来越多的药物考虑利用抗体介导靶向GPCR。这其中最引人注目的可能就是骆驼(单峰驼)、羊驼等骆驼科动物的重链抗体(hcAbs)。在hcAb的抗原结合区(又称单域抗体),兼具低分子量(低空间位阻和低表达成本)与单克隆特点(高度的亲和力与特异性),是偶联GPCR作用药物的理想导向分子。
不同类型抗体片段的大小与常见宿主
随着结构生物学和生物化学技术的不断取得突破,越来越多的GPCR可以实现体外的合成,结构的解析也越来越清晰,但是针对GPCR的抗体制备依然非常困难。艾伯森生物通过多年的项目实践经验,积累了数种多次跨膜蛋白抗体制备方法,包括经典的可溶区蛋白设计方案,重组蛋白免疫方案,以及公司技术人员开发的基于全细胞免疫的抗体制备方案,以最小的试验风险,获得最优品质的抗体,为客户量身打造最佳的抗体制备思路。
服务组合
服务项目 (Service Items) | 周期(周) Time(weeks) | 重组蛋白方案 Recombination Protein Immunization | 全细胞免疫方案 Whole Cell Immunization |
多肽设计与合成 Peptide design & synthesis | 多肽设计 Peptide design | ~2 |
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多肽合成 Peptide synthesis |
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小分子或多肽偶联 conjugation |
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蛋白制备 proteins preparation | cDNA合成 cDNA synthesis | 6~8 | √ | √ |
载体构建 Vector construction | √ | √ |
蛋白表达与纯化 Protein expression & purification | √ | √ |
免疫阶段 Immunization | 免疫2只兔子 Immunized 2 rabbits | ~8 | √ |
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免疫5只小鼠 Immunized 5 mice |
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ELISA检测 Elisa detection | √ | √ |
细胞融合与筛选 Fusion & Screening | 1.5 |
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亚克隆阶段 subcloning | 1 |
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腹水生产(5只小鼠) Ascites production (Injection on 5 mice) | 1 |
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纯化与检测 Purification and detection | 标签纯化 Tag affinity purification | ~1 | √ | √ |
亲和纯化 Affinity purification | √ |
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特异性亲和纯化 Antigen specific affinity purification |
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总周期(月) Total lead time(months) | 3~4 | 3~5 | 4~6 | 6~8 |
注:
1)价格面议;
2)请慎重考虑周期事宜,以上时间仅为理想条件下最短周期。