“Knobs into Holes”的方法是一种是基于经过修饰的人抗体编码基因在哺乳动物细胞的转染的技术。这种方法的优点是产生的双特异性抗体是人的而不是小鼠或大鼠的，因此免疫原性小。“Knobs intoHoles”方法生产双特异性抗体是替换相反的CH3结构域的单个氨基酸，以促进形成重链异二聚体。此外，为优化重链的关联以及双特异性抗体的稳定性，会再引入六个突变：（S354A，T166W）和（Y349C，T366S，L368A，Y407V）。另外，会引入一个额外的二硫键以稳定异源二聚体的Fc部分。

艾柏森生物提供基于Knobs-Into-Holes技术的双特异性抗体开发服务。