差示扫描量热法(Differential Scanning Calorimetry, DSC)是一种用于直接鉴定蛋白质或其他生物分子在自然状态下的稳定性的技术,该技术通过测量与分子恒速加热时热变性相关的热量变化予以实现。艾柏森生物可提供优质的DSC服务,从DSC获得精确、高质量的数据,提供有关蛋白质在工艺开发过程中和潜在候选治疗药物配制过程中的稳定性的重要信息。 大分子和大分子组合体(>5000道尔顿),如蛋白质、核酸和脂类,可形成经过热诱导构象变化的清晰结构。这些结构重组的结果是,非共价键重新分配导致热吸收。DSC可测量这种热摄取。 DSC如何工作…… DSC系统的热核心包括两个池,一个参比池和一个样品池。进行DSC测量时,向参比池中注入缓冲液,同时向样品池中注入样品溶液,然后以恒定的扫描速率对其进行加热。当蛋白质展开导致两池之间有温差(△T)时就会发生热吸收,从而在整个帕尔贴单元内形成热梯度。这就建立了电压,该电压被转换成电力,并用于控制帕尔贴单元将△T恢复为0,或者也允许两个池通过传导而被动达到热平衡。 数据生成和分析 蛋白质展开状态的热焓是浓度正态化DSC峰下的面积,并且每摩尔有多个热量单位。在某些情况下,可使用热力学模型拟合数据,以获得吉布斯自由能(△G)、量热焓(△Hcal)、范特霍夫焓(△HVH)、熵(△S)和与跃迁相关的热容变化(△Cp)。 技术服务内容: ★ 鉴定和选择生物药开发过程中最稳定的蛋白质或潜在候选药物 ★ 配体相互作用研究 ★ 纯化和生产条件的快速优化 ★ 简易、快速确定液体制剂的最佳条件 ★ 对用于筛选的靶蛋白进行快速稳定性指示分析 结果交付 ★ 实验原始数据及分析结果 ★ 电子图片&完整实验报告,包括实验步骤、使用试剂、仪器、软件检索参数等 |
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